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Porter法

由于Bate-Smith法測定的結(jié)果重現(xiàn)性很差，并且原花青素在此條件下反應(yīng)不是很。因此Porter等人對Bate- Smith法進(jìn)行了改進(jìn)。Porter法改進(jìn)之處主要是在試劑中添加了Fe3+，以提高反應(yīng)的程度和顏色的穩(wěn)定性。此方法測定的也是原花青素的相對含量，結(jié)果用PVU（porter value unit）表示。porter法的原理同Bate- Smith法。

操作程序

稱取適量的葡萄籽提取物（約10~ 30mg）用甲醇溶解，最后定溶于100mL。從中取1mL樣品溶液加到10mL比色管中，然后依次加入6mL鹽酸-正丁醇（5/95，V/V），0.2mL 2.0%硫酸鐵銨溶液（用2mol.L-1的鹽酸溶解），在97℃下反應(yīng)40min后，取出迅速冷卻，在550nm處測定其吸光度，以甲醇代替提取物溶液作為空白。

PVU = A × 7.2/W。A：吸光度；W：樣品質(zhì)量（g）。

美國葡萄籽方法評定委員會(huì)認(rèn)為葡萄籽提取物的PVU在250~ 350之間是比較理想的。PVU過低，可能說明該產(chǎn)品中原花青素的含量較低；PVU過高，說明該產(chǎn)品中高聚體原花青素含量較高。但由于porter法不能區(qū)分測出的是何種原花青素，所以若一種葡萄籽提取物測出的PVU為300，則該產(chǎn)品可能是低聚體原花青素含量較多，也可能是單體和高聚體原花青素含量較多。

美國葡萄籽方法評定委員會(huì)認(rèn)為上述兩種方法不能作為葡萄籽提取物中總多酚或原花青素的定量分析方法。